在HPLC和GC的仪器分析过程中,为了确保精密度和准确性,实验员都要考虑样品运行前仪器条件是否稳定。对于色谱法来说,这项稳定性的考察可以通过基线检查来进行。传统的工作方法中,许多实验室都以目测的形式来衡量基线是否平稳,而这样的评测方式没有量化的指标,也无法对基线状况留下记录,不能符合实验室管理的更高要求。今天我们就教大家一种使用EZChrom软件自动化执行基线检查的方法。
. g, y1 K$ ?* n6 s/ V9 s5 h. P3 X5 k
色谱法所提到的基线即进样前仪器保持方法的初始条件空白运行的检测器信号。它实时的反映了仪器的状态,例如液相色谱流动相的置换平衡是否完成,系统的温度是否稳定,检测器的光源是否已预热等等,对于气相色谱则反映出柱温箱的温度情况以及色谱柱的状态。所以进样前都需执行一段时间的基线检查,以确定仪器条件。
& E, u! |( W6 i/ dEZChrom软件中基线检查可以通过以下几个步骤来执行:
1.设置基线检查标准:
在样品运行方法的仪器设置窗口中,切换至基线检查页签。在页签中设置如下项目:
检查通过的时间:即基线要通过测试必须满足的长度条件,也就是说,软件会以此时间为单位计算噪声和漂移,并进行评估。如评估通过,则基线检查完成并执行样品运行,如评估失败,则在停止检查之前继续下一个时间单元进行评估。
检查停止的时间:即用于基线检查的最长时间。也就是说在反复执行基线评估的过程中,始终无法达到预定标准,则最长运行至此时间,基线检查将被强制结束,检查失败。第二个时间必须大于第一个时间。
噪音测试方法:设置噪音的计算公式,公式详情见help-参比-内部计算。
测试通道:可在采集参数中所定义的通道中进行选择。
噪音测试:启用并指定噪音计算的最大可接受值。应根据信号来源,仪器状态和方法要求进行设置。
漂移测试:启用并指定漂移计算的最大可接受值。同样应根据实验情况进行设置。
2. 运行基线检查:
基线检查的运行有两种方式:
3.查看基线检查结果
在菜单中选择查看-基线检查状态,可以查看最近一次基线检查的状态信息。
4.打印基线检查报告
在菜单中选择报告-查看-基线检查,可查看并打印最近一次基线检查的评估结果。
在标准报告模板中,右键-插入报告-基线检查报告,可以将基线检查报告作为报告的一个模块,与样品结果一起打印。
5 r! a+ ]) ~9 s3 q+ W+ `2 S; k对基线检查的结果进行量化的评价,有利于确保实验结果的可靠性。将检查结果进行保存并输出报告,将为实验结果的保存,审计和复核提供更多的依据。