【极限原创】月旭苯基柱测定恩他卡朋有关物质

【极限原创】月旭苯基柱测定恩他卡朋有关物质2014-08-11 月旭科技
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文章出处：【极限体验】的文章均来自月旭科技论坛的版友使用月旭色谱产品的真实体验。

& O- U) P6 L3 Y' v% t$ a* q简介

　　珂丹 Company filmtab
. P# m' W% ^* L. X0 Q$ m1 L　　通用名：恩他卡朋片
　　制造商：诺华

恩他卡朋的化学名称为 ：(E)-2-氰基-3-（3，4-二羟基-5-硝苯基）-N，N-二乙基-2-丙烯酰胺，分子式 ：C14H15N3O5，分子量 ：305.28。

药理作用

　　本品属于儿茶酚-O-甲基转移酶（COMT）抑制剂，它是一种可逆的、特异性的、主要作用于外周的COMT抑制剂，与左旋多巴制剂同时使用。本品通过抑制COMT酶减少左旋多巴代谢为3-氧位-甲基多巴（3-OMD），这使左旋多巴的生物利用度增加，并增加了脑内可利用的左旋多巴总量，这种作用已在临床试验中得到证实。临床试验显示，左旋多巴加用本品可延长"开"的时间达16%，缩短"关"的时间达24%。本品主要抑制周围组织中的COMT。红细胞内的COMT抑制作用与本品的血浆浓度密切相关，而体现了COMT抑制作用的可逆性。

  U+ M) X8 B4 A, x+ F色谱柱信息：
. `4 @4 G2 C! xULTIMATE XB-PHENY1 4.6*100MM,3微米；sn：141301512

色谱条件：

参照进口标准和USP35-NF30;

进口标准：

测定法：HPLC法；

流动相：磷酸盐缓冲液（pH2.1）（加1.80g磷酸二氢钠和磷酸2ml，加水至1000ml）-甲醇-四氢呋喃（54:44:2）
流速：1.0 ml/min，柱温：35℃，检测波长：300nm。
色谱柱：苯基柱（100mm×4.6mm，3μm），进样量：20μl

供试品溶液：3mg/ml 精密称取适量（约相当于恩他卡朋0.15g），置50ml量瓶中，加四氢呋喃15ml超声溶解3分钟，加甲醇15ml，振摇5分钟，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。
7 s( u* ^5 b; U8 x, L( b3 B: h9 f对照品溶液：3μg/ml的恩他卡朋与OR-454对照品混合溶液；定量限溶液：0.15μg/ml的恩他卡朋与OR-454对照品混合溶液。进样6次，RSD＜10.0%。

系统适用性溶液：3μg/ml的恩他卡朋与（z）-OR-611对照品混合溶液。

计算方法：外标法

OR-454和其他单一杂质的含量均不得过0.1%，杂质总量不得过0.5%（小于0.05%的杂质可忽略不计）应符合规定。整个测试过程应在7小时内完成。

) l% P& ^4 K4 K1 P' m$ [" Musp：

测定法：HPLC法；

流动相：磷酸盐缓冲液（pH2.1）（加2.1g磷酸二氢钠加水至1000ml，用磷酸调节pH值至2.1）-甲醇-四氢呋喃（54:44:2），

流速：1.0ml/min，柱温：35℃，检测波长：300nm。
0 }* |6 l8 ]8 w9 Z& }" K色谱柱：苯基柱（250mm×4.6mm，5μm），进样量：20μ，l溶剂：四氢呋喃-甲醇（3:7）

供试品溶液：3mg/ml 精密称取适量（约相当于恩他卡朋0.15g），置50ml量瓶中，加四氢呋喃15ml超声溶解3分钟，加甲醇15ml，振摇5分钟，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

对照品溶液：3μg/ml 进样6次，RSD＜10.0%

系统适用性溶液：3μg/ml的恩他卡朋与恩他卡朋杂质A混合溶液

计算方法：外标法。整个测试过程应在7小时内完成。

杂质名称      RRT       杂质限度(%)
6 Z; p* u0 K: N4 q3 u6 r/ L
- g7 }8 h% `; t3 |# l杂质A           0.8          不得过0.2

# P. x5 J; W+ R; o单杂              -             不得过0.1

总杂              -             不得过0.2

综合后，参照进口标准。

色谱图如下：

1.系统适用性试验溶液：

                               
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备注：（z）-OR-611就是usp中的杂质A，中文名：（Z）- 2-氰基-3-（3,4-二羟基-5-硝基酚）-N，N-二乙基丙烯酰胺；因无法购进OR-454杂质对照品，故系统没有此杂质峰。另老外的标准喜欢用代码表示，为保密，故在仿制药研究要注意。

2.对照品溶液：

                               
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3.空白溶剂：

5 ?/ T7 U/ `- K                               
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4.供试液：

                               
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5.供试液放大色谱图：

5 B6 J: ~$ _* E, V+ T3 x                               
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综上所述：月旭苯基色谱柱适用于分离恩他卡朋有关物质，且分离效果良好。

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好东东，感谢分享