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' w+ m( X+ l) tEzchrom软件常见问题 R& D0 j! s. h5 Y p1 D& Y5 o8 l; ]
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1. 如何得到理论塔板数和分离度 1.1 需要在方法菜单下的高级菜单-色谱柱/性能中,勾选-计算此通道的性能参数: ( f) Y9 R9 h3 h5 y
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7 J. l% u5 K- s1.2 再在自定义报告界面中,在显示保留时间,峰面积等相关结果的表格中点击邮件,选择报告属性。在弹出的对话框中,将左侧列表中的理论塔板数、分离度和拖尾因子(即为“不对称”)等相关参数添加到右侧,点击确定即可。如果结果没有更新,请点击分析菜单下的分析,让软件进行计算更新
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2. 软件打开显示演示模式 Ezchrom软件附带有个dongle,作为软件的license许可,如果这个dongle损坏或丢失,则软件无法正常使用,只会显示演示模式 * @% H$ r4 M2 Y2 C3 b- w
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% I; O! B/ ^1 O0 m3. ezchrom的峰面积和峰高单位是什么,为什么数值特别大 ezchrom工作站中,得到的峰面积,峰高等结果都是整数结果,没有小数点。为了保证有足够的有效数字去计算,ezchrom将所得到的信号结果都做了处理,不同的检测器输出的信号结果都除以不同的系数,从而得到了一个与chemstation结果相比大了好几个数量级的数值。因此,ezchrom得到的峰高不是mAu,不是mv,不是pA,而是自己的unit单位。如果想得到换算之前的峰高,可以通过自定义参数来操作。具体步骤如下: 1)方法菜单下选择高级,切到自定义参数界面,做如下设置,parameter中取名为heightconversion,type为per-peak,returns选number,source中选择C盘下ezchrom elite文件夹下的signal conversion.dll文件,additional parameter中输入1,如下图所示: , m, O8 L4 v5 m
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+ |# a+ G" E( J6 f$ X [ I2) 点击分析后,进入自定义报告界面,右键结果栏选择报告属性,在左侧栏找到height conversion参数,添加到右侧,点击确定后,在height conversion这栏项下显示的即为真实的峰高结果 ( O6 Y( A6 T- h- P+ \. I
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0 ?8 w1 a! M* v) _4 x f3 ~4. 如何得到信噪比 4.1 EP信噪比 4.1.1.调出方法和数据 4.1.2.方法——高级——自定义参数
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% J9 r& W. \) g6 U! P在源那选signal noise 则得到EP算法的信噪比。在其他参数那规定噪声的数据文件名(eg:1.dat),时间范围 4.1.3.方法——报告——右键——导入报告,在积分结果表——右键——报告属性 ! ]2 y4 y/ P: ]
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把信噪比和噪声添加到右边,——ok
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8 v& k" C6 G+ t8 S- P4.1.4.文件——保存——方法 4.1.5.再点分析——分析,然后报告——查看——方法报告
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' Q# L, l8 c3 o( N- k# y; t5 {4 D' I注意:在自定义参数中其他参数那输入的X.DAT是空白数据的数据文件名,如果要得到这个空白数据的噪声,没法直接用这个图来算,只有从其他色谱图上通过如上的操作得到噪声。噪声的时间必须要大于等于0.5Min,否者得不到噪声和信噪比. 4.2. USP信噪比 4.2.1.调出方法和数据 4.2.2.方法——高级——自定义参数
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在源那选signal noise usp则得到USP算法的信噪比。在其他参数那规定噪声的时间范围 4.2.3.方法——报告——右键——导入报告,在积分结果表——右键——报告属性 把信噪比和噪声添加到右边,——ok(同4.1.3) 4.2.4.文件——保存——方法(同4.1.4) 4.2.5.再点分析——分析,然后报告——查看——方法报告(同4.1.5) 注意:要得到USP的噪声和信噪比,必须色谱图上要积分,要不在连接宏signal noise USP会出错,不会算出结果来。
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5. 什么是AFS? AFS是advanced file security的缩写,ezchrom加载AFS选项后,只有特定组的用户才可以从文件管理器里访问ezchrom的enterprise路径。其余用户均只能从ezchrom软件界面才可以实现文件的存取和打开。加载AFS可以实现更高级别的文件安全保护
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6. 如何做峰加和定量 6.1 调用第一个浓度的标准品谱图,优化好积分参数,在谱图上点击鼠标右键,选择图形化编程—定义组; ! y. K0 N: y/ g. m# B/ e2 d" J
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) S1 _7 ^' V5 u1 M0 D L1 W) U( G6.2 在要包括在组中的第一个峰的左侧单击一次鼠标。此操作定义了组窗口的开始。在要包括在组窗口中的最后一个峰的右侧再次单击一次鼠标。此操作定义了组窗口的结束。如果要将其他峰区域添加到相同的组,重复必要次数的以上步骤。当您完成将峰添加到组后,按 [ESC] 键。 6.3 出现以下对话框,编辑组名称,选择组类型为校正范围,并指定组的参比峰和内标。点击确定
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6.4 在峰/组表中,选择“组”标签,设置好拟合类型,输入各个级别的浓度;如果要过零点,则勾选零位
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1 K T# V" M) X1 n' U6.5 点击分析菜单下面的分析/单级校正 1 e& ^ U! g2 B- X9 F+ v; x
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1 J2 l% ?9 |4 L$ B K% u3 N% w6.6 在弹出的窗口中,勾选“校正”,输入校正级别为1,再勾选“清除校正级别”,点击“开始”
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$ B U! t4 T; Q6.7 点击“检查校正”,在右边点击鼠标左键,选择“查看模式”为组;可以看到有一个数据点的校正曲线 ! v9 T+ y6 P% X! z9 }3 Q* G1 @
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6.8 调用第二个浓度点的数据,点击分析菜单下面的“分析/单级校正”,勾选“校正”,输入校正级别为2,点击“开始” 6.9点击“检查校正”,可以看到两个浓度点的曲线。如果要添加更多级别的浓度点,则重复第9步和第10步的操作。校正曲线建立完成。 6.10 调用样品数据文件,点击分析菜单下面的“分析”; 6.11 点击“报告”菜单,在空白处点击鼠标右键,选择“导入报告”,选择外标法报告模板打开,如“external standard-horiz.rep”; 6.12在报告模板的表格区域,点击鼠标右键,选择”报告属性“; 6.13 根据需要选择报告的参数,下图红色区域部分,勾选“组”
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