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示差检测器是高效液相色谱仪上的一种检测器,配合液相色谱仪对样品进行分析检测。) W. y- |" J6 i5 I2 L6 I
示差折光检测器是基于样品组分的折射率与流动相折射率有差异,当组分洗脱出来时会引起流动相折射率发生变化,这种变化与样品组分的浓度成正比,从而进行检测。
& V2 z: r" w- r6 x6 Z: M& k一、示差折光检测器类型:
1 Y" A; t+ X' ]1、反射型:根据Fresnel定律。
4 b8 K8 T% ~! M2、折射型:根据Snell定律。
7 s5 _7 H1 ^% o, \# R- `! b3、干涉型。; c( S" T: v7 ?4 b% ^0 N( U' D
二、示差折光检测器特点:$ H9 x' t7 @' V% E
1、绝大多数物质的折射率与流动相都有差异,属于通用型检测器。
% G/ j/ X# d8 [! S- G& ?' _4 q2、灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。
4 z( P1 q, u, T% g三、示差折光检测器应用:
/ u: b4 x9 o# Q) O% u8 I6 e! \% P1、比较适合检测无紫外吸收的有机物,如高分子化合物、糖类和脂肪烷烃等。$ f' z7 t9 Y& R) }
2、在凝胶色谱仪中是必备的检测器。. E; U# H2 M2 R. k1 x8 j! g! J9 o
3、在制备色谱仪中经常使用。8 x& }% ^1 h/ L$ N) [
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0 ^# o4 H0 M- P8 y% e' O优点:对糖类检测灵敏度较高,其检测限可达10-8g/ml;稳定性好,操作方便。
: Q# [/ V6 y$ N+ J缺点:该检测器对多数物质的灵敏度低(约10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受环境温度、流动相组成等波动的影响较大,不适合梯度洗脱5 a$ p2 a7 g' y/ X- k
/ Y b6 N5 U, C3 }5 x5 ]! y( r: G2 ?* I# q; Q( y
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$ S% ^& N$ q) J) D8 E应用2 t% U# C- M7 ^* q( Y
* c5 t/ s: a) a9 } B示差折光检测器主要受温度、流速以及流动相的种类等因素的影响,示差折光检测器是较难稳定,但是和仪器本身的硬件条件有问题,如能设法控制以下几个因素,情况会大有改善: (1)流动相一定要混匀,而且要充分脱气,最好用单元泵。 (2)有条件的话将溶剂瓶、柱温箱、检测器的光学单元温度控制在同一个温度,且最好高于室温5~10℃。不要将检测器放置在通风橱或是空调出风口处。 (3)环境温度不要变化太大,实验室最好门窗关闭,如果没有柱温箱那就把检测器温度调低一点。 (4)要把废液瓶和溶剂瓶放在示差检测器与泵以上位置,这样可以使样品池略有压力,有助于优化检测器性能。 此外,在安装示差检测器时,由于其流通池的反压估计为5bar,所以示差检测器在流路系统里必 须放在最后。如果还要在系统里增加一个检测器,必须放在示差检测器的前面,以防压力增大时损坏 示差检测器的流通池。同时建议在运输或搬迁示差检测器到其他场所时,流通池里最好装有异丙醇, 这是为避免在周围环境温度降低时使流通池破裂。
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