安捷伦1260液相操作规程

Agilent1260高效液相色谱仪操作规程

一、目的：

二、范围：

三、职责：

四、内容：

1.   开机　　

1.1  打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows XP画面。　　

1.2  打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。（注意：在“仪器1脱机”关闭的情况下，“仪器1联机”方能打开。）　　

1.3  从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。　　

1.4  确保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。单击“确定”。 （注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。　　

1.5  轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。设流量为5ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。　　

1.6  右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。设流量为：0ml/min，单击“确定”， 轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。　　

2.   数据采集方法、系列编辑：　　

2.1. 编辑完整方法：　　

2.1.1. 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，选中除“数据分析 ”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。　　

2.1.2. 方法信息：　　

在“方法注释”中写入方法的相关信息。此项可忽略不写，单击“确定”，进入下一界面“选择进样源/位置”。

2.1.3. 自动进样器参数设定:　　

选择“Als”的进样方式，单击“确定”，进入下一界面“设置方法”。　　

2.1.4. 方法参数设定：　　

在“设置方法”界面选择“四元泵”选项，在“流量”处输入所需流量，如：1ml/min，在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D)，也可在右侧“时间表”项下选择“添加”，编辑梯度。在“停止时间”项下输入样品运行时间，在“压力限值”输入柱子的最大耐高压，如400bar，以保护柱子。　　

选择“进样器”选项输入进样体积。　　

选择“TCC” 选项，在左侧输入所需温度或选“不控制“，选中“和左侧相同”---使柱温箱的温度左右一致。

选择“VWD” 选项输入检测波长，一般选择最大吸收处的波长；该仪器只能设一个波长。　

以上各项编辑完后，单击“确定”，进入下一界面“运行时选项表”。　　

进入“运行时选项表”选中“数据采集”和“标准数据分析”，单击“确定”。　　

2.1.5. 保存方法：　　

方法编辑完，在“方法” 菜单中选则“方法另存为”为新建方法命名，单击“确定”。　

2.2. 数据采集方法：　　

2.2.1. 序列参数编辑：　　

在“序列”菜单中选择“序列参数”，在弹出对话框中输入操作者名称，数据存储目录路径中的子目录，子目录即为数据图谱存储的文件夹，请认真填写，输入后，鼠标点击其他处，会自动弹出“E:\---不存在，要创建它吗？”单击“确定”， 再选择“手动”或“前缀/计数器”。　　

2.2.2. 编辑序列表：　　

编辑序列表：在“序列”菜单中选择“序列表”，在表格中可进行“插入”、“剪切”、“复制”、“粘贴”、“追加行”等操作，表格中必须填写“样品瓶”、“样品名称”、“方法名称”、“进样次数”、“数据文件”、“进样量”等信息，其他信息可选择编辑。编辑完成后，单击“确定”。 在“序列”菜单中选择“序列模板另存为”，为新建序列命名。　

2.2.3. 运行序列：　　

色谱柱安装完成后，在“仪器”菜单中选择“系统开启”或单击界面右侧绿色的“打开”快捷键，平衡色谱柱，等基线平稳，在“仪器”菜单中选择“运行序列”。停止采集数据选择“仪器”菜单中 “停止运行/进样/序列”。

3. 数据分析方法编辑:　　

3.1. 打开“仪器1脱机”。从“视图”菜单中，单击“数据分析”进入数据分析界面。　

3.2. 从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件，单击“确定”。　　

3.3. 做谱图优化，从“图形”菜单中选择“信号选项”选项，根据自身需要选择合适项，如：从范围中选择自定义量程设置合适的时间范围和响应范围，或调整，反复进行，直到图的比例合适为止。　　

3.4. 积分:　　

从“积分”菜单中选择 “积分事件”，设置合适积分参数 “斜率灵敏度”，“峰宽”，“最小峰面积”，“最小峰高”等项。点击“积分”菜单中“积分”， 则数据被积分。　　

如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。　　

单击左边“√”图标，将积分参数存入方法。　　

3.5. 打印报告:　　

从“报告”菜单中选择“设定报告”选项。选择需要的报告类型。　　

从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将被打印出来。　

4. 关机:　　

4.1. 关机前，用10%甲醇水溶液冲洗柱子和系统至少半小时，流量0.4至0.8ml/min，再用100%有机溶剂冲0.5小时，最后用60%-70%甲醇水溶液替换系统管路及色谱柱内的溶液，然后关泵，（适于反相色谱柱）。

4.2. 退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机。　　

4.3. 关闭全部电源，稳压器等。

5. 注意事项：　　

5.1. 氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品即关灯；　　

5.2. 开机时，打开冲洗阀，10%甲醇水溶液，泵流量5ml/min，若此时显示压力 >20bar，则应更换排气阀内过滤白头。　　

5.3. 流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。　　

5.4. 配制10%异丙醇，以每5分钟进行0.2分钟的自动seal-wash即可，用缓冲盐时必须开启seal-wash。　

五、记录：仪器使用后，及时填写«仪器使用记录»。

六、维护与保养：仪器使用后，用洁净的软布擦拭仪器表面；将四个通道内的液体换成20%以上的甲醇水溶液，避免仪器管路张菌；及时更换溶剂瓶内的甲醇水溶液（包括泵头清洗液），然后认真刷洗溶剂瓶，晾干后使用。

楼主辛苦了

补充：色谱柱的使用和保存
.1  安装色谱柱时应使流动相流路的方向与色谱柱标签上箭头所示方向一致。
.2  进样前，色谱柱应用流动相充分冲洗平衡。
.3  色谱柱在使用过程中，应避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度
0 s2 h' W5 W0 k: h+ B       的突然变化或者机械震动都会影响柱内固定相的填充状况；柱压的突然升高
       或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流动相流速时应该缓慢进行。
1 _( ?* w; N/ K.4  试验结束后，可对色谱柱进行冲洗和保存。
.5  如果色谱柱需要长期保存，色谱柱可以贮存在含有5%甲醇或含有0.05%叠氮 化钠的水中，并将色谱柱两端密封，以免干燥，室温保存。

谢谢楼主分享，呵呵，要是有PDF版本的就更好了，有图的！

呵呵，多谢各位群友的补充，这样的SOP更加具有可操作性了。

真是不错，谢谢分享，谢谢大家的补充

楼主辛苦了

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