同写意42期“优秀药物分析总监之路”培训有感

2015年下半年，是政策迭出的半年，各种消息一波又一波，让药企研发人员应接不暇；悬崖边上，药企怎么整？是一蹶不振还是重新思索、重新出发？

记得有句名言：这是最坏的时代，也是最好的时代；当各种的风暴过后，所有的政策都指向一个问题：提高我国药品质量；11月份的同写意第41期 “优秀药物分析经理之路”面对刚需，直击痛点，给大家梳理了如何紧跟国外要求和标准，从样品测试向质量研究阶段迈进，从简单的基本功，再到杂质谱分析研究、溶出曲线比对，一路摸索前行。讲课的大咖们翻越过无数的险峰和陷阱，用自己的经验教训让听课人员事半功倍。
作为一个非专业质量研究人员参会，对于大咖们精心准备的案例，建议直接到现场聆听！我从另外的角度来讲一下自己的感想：

- R3 W3 [4 }! v; ]8 P   一、侧重实战，与时俱进：指导在新形势下的药物分析总监，如何走出困惑，直面挑战：
   1、分析总监在研发过程中的使命、宏观思维和研究策略
$ c; X7 G, e$ i; ^    分析总监在药物研发质量中起的是灵魂作用，不仅要自赋使命，还要与时俱进；不仅要自身专业过硬，能解决难点、痛点，还要提升分析工作在团队中的地位；不仅需要对新药研究全流程进行系统管理，还要有持续不断的团队打造能力；
3 K" Z5 s  R) r( t
! Y6 v3 q# H- L   2、分析总监需要知道什么？
指导原则：
. L) ?8 Y! y- Q+ n2 H" UØICH 指导原则 (美国、欧盟、日本）
ØEMA 指导原则 （欧盟）
% g  t6 V3 t0 i+ ]3 }4 tØFDA 指导原则 （美国）
ØTGA 指导原则 (加拿大）
0 D9 _/ I3 b, i: \; GØTPD 指导原则 (澳大利亚）

   3、重点需要知道什么？
" d8 \4 L4 @- Z  Z  w$ o) XØQuality (Q),
Ø Safety (S),
/ N6 Z* u" V% T* uØ Efficacy (E),
Ø Multidisciolinary (M)
: a: J" G% K1 g+ K" m2 x6 `: A
! w2 q! u4 {& y# X* ~; K/ K4、作为分析总监，您能回到下列问题吗？
  各种指导原则的掌握（ICH等）；
# l7 f, X/ y1 I6 S! ^; t+ k  SOP、培训、法规文件的执行；
) y) E( n; l2 _9 A/ P  分析方法
* V8 r: c0 j' Q1 F) B4 j* d8 A9 B: s& Q  杂质谱：
  质量标准：
  稳定性研究（物料平衡、货架期）？
; j0 [+ _: p$ o- T  理化性质：
! c/ [1 ?- e( D& F, k! D- g  研发过程中的质量设计、风险控制

二、什么方法是最好的方法？
肖博士神回答：傻子方法是最好的方法！它被转移到任何地方都不会出现问题！
为什么？
& A; {. g* V  W* a( H* P傻子方法并非傻子能建立，它的建立需要科学系统地
研究一旦建立并通过严格的方法验证，任何稍有专业
背景的人都能够按照方法操作而不会出任何问题。

0 `# L$ S# L0 f% i) H+ c$ r三、案例实操
1、案例Ia: 片剂物料平衡缺失的研究(原研药-NDA前)
6 e( G1 d7 ?- [( O4 s9 Q! o国产：pKa1 = 2.8, pKa2 =9.6
湿热条件下(40oC/RH75)含量下5%而有关物质小于1%；其它条件有不同程度的物料平衡问题；
; H6 W8 N1 i  ^% n) W问题：原方法并未发现含量减少相应的有关物质！
解决方案：
1 w3 v- R$ N0 X2 T0 V* n1）研究模型体系的建立：自制充分量的相关样品(因少量的稳定性样品无法满足系统研究的需要)，24 小时就能产生和实际稳定性样品相关的降解产物。发现乳糖原来是造成API降解的因素啊！
6 t" ~9 F+ t+ p8 I6 r! |2）制剂中的杂质来源分析：
a) 重点关注点制剂产生降解物产生的途径：与辅料或包材发生反应；与辅料或包材中的杂质发生反应；
b) 下述杂质已被研究：原料药本身（包括在湿热、光照、酸碱条件下降解）；已涵盖于在API质量研究中；
c) 辅料或包材带来的杂质；
3）用LC/MS 研究主峰坡周围的杂质峰
9 j4 h- F) o) k4）用新的方法（酸性条件）先将整个峰坡与主峰分开
0 @: q1 N4 K9 \" I5）再用慢梯度将整个峰坡“Hump”分开
1 ^0 E8 c7 L+ t0 H% ~1 O6）用上述方法来比较含量和有关杂质的结果，进一步优化色谱条件；
7）问题解决；
/ r; |( `9 e8 E& b
2、碱性药物高效液相色谱分析的挑战以及改进方法(原研药-早期)
9 @! k+ l- X% g$ Y+ G1) 为什么讨论这个话题？
% T/ i! n0 Q9 z! ], ~a) 药物的来源：~70% 碱, ~ 20% 酸, ~10% 其它对于常见的反相柱：仍有~ 50% 硅醇基是没有被反相填料材料覆盖；
b) 质子化的碱和硅醇基的离子相互作用
        BH+ + SiO−M+ → SiO−BH+ + M+
c) 游离碱的保留由三方面决定:
) v: }( U, t( ~7 G        k = kRP+ kIX+ k*RP k*IX
6 w1 e/ G4 R9 qd) 液相色谱学基础知识（Introduction to Modern liquid Chromatography, Third Edition,Lloyd R. Snyder, Joseph J. Kirkland, John W. Dolan）
" C& p6 L; a2 ^- [5 we) 碱性药物高效液相色谱分析的挑战以及改进方法（The Challenges of the Analysis of Basic Compounds by High Performance Liquid Chromatography: Some Possible Approaches for Improved Separations David V. McCalley , J Chromatogr A,1217 (2010) 858-880）
& M' j. y( {4 I5 j6 E2) 现象：上-中性条件：API 与N-甲基化杂质无分离；下-酸性条件: API 与N-甲基化杂质完全分离；
3) 各种问题：
% b' a; t8 |: Q* m  Ka) 相同的中性色谱条件（流动相和固定相）下等度和梯度色谱图的比较UV @ 230 nm为什么洗脱次序颠倒了呢？而在酸性条件(方法2)下：API(碱性化合物)的严重拖尾现象？
7 K+ }$ L9 @1 [( T& A: w& q( }2 Eb) 猜测：是由于硅醇基作用的拖尾现象吗？显然不是！那又是什么原因呢？
) M* r, y0 s( a" I& L- ac) 为何只有碱性化合物(API)随样品量增加而拖尾，但中性化合物(甲苯,Toluene)却未见此现象？
; B, O; E& [2 {' K+ Z+ d0 J$ z  j( K4) 需要解决的问题：
    既然此AQ 柱属于未封端类型的，有可能是造成峰拖尾的罪魁，那为什么还要坚持用它作为主要研究的柱子直到最终建立高选择性、高柱效的方法呢？
a) 高水溶性化合物和相应的杂质分离需要AQ 柱碱性化合物在酸性条件(甲酸系统)的分离是最常见的色谱条件；
b) 碱性化合物在酸性条件的拖尾的原因(区别于我们常见的碱性化合物在中性条件下的拖尾现象)；
7 L/ y3 b8 ]4 ^+ |/ i& yc) 对于本项目最佳分离的pH范围；
% q9 t3 ^& Z6 f+ i* g5 jd) 离子强度对于柱效的影响(弥补甲酸的离子强度低的弱点)；
5) 研究小结
4 n. k, U1 L: c, i; \5 RØ 酸性流动相条件下碱性化合物样品常有负载低的问题；
Ø 磷酸盐缓冲液(10mM)在pH 2.3和pH 7.2时峰形没有什么区别，因此硅烷醇基的相互作用不是样品超载的主要因素；
Ø 增加流动相的离子强度提高负载能力和效率。氯化铵的加入是一个便捷的方法来增加离子强度而不改变pH值或增加基线噪声，是一种提高在低pH值碱性分析物的色谱行为的一种方法；
Ø 通过DryLab优化并进一步验证了高效液相色谱法和UHPLC方法

四、严谨敬业，使命所系
, e( d! g) X$ ~4 H2 o( v, [; e    以上内容是我从肖博士460多页PPT摘选出来，凝聚了他职业生涯的精髓，是一个新药研发分析大咖的呕心之作。
; j- {+ w* b4 s    药品质量是分析的魂魄所在，在药品研发的拐点，正好是修炼内功，蓄势待发的好时代，除了磨刀霍霍之外，还要积极学习，同写意的现场课程更精彩！

" U' l# Y# R' U

任重道远，学习的空间大大的。谢谢楼主分享！

谢谢楼主分享

要是有录音和课件就好了。谢谢分享。