WatersAcquity_UPLC

Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪操作规程 自己写的一个,仅供参考,请尊重原创

Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD

超高效液相质谱联用仪 操作规程

一、 目的：为了安全、规范、正确使用超高效液相质谱联用仪，特制订本操作规程。

二、 范围：仅适用于沃特世超高效液相质谱联用仪。

三、 环境要求：温度20 ～25℃，相对湿度低于65% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。

四、操作步骤：

1.完整开机顺序：开氩气、氮气→开电脑主机→自动进样器→泵→柱温箱→检测器→质谱（注：开电脑主机后等待2～3分钟，开自动进样器后需要开机自检通过后再打开其他模块，质谱开启后需要等待3～5分钟使得自检通过）

2.抽真空：桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件，点击Mass Tune ，选择Vacuum项下pump开始抽真空。（注：观察Diagnostics 界面下Turbo Speed 抽真空速度要达到80%以上，压力在1.30-e-5左右。抽真空的状态至少4小时以上。）

3.日常开机顺序：液相：灌注流动相和洗针液

质谱：开气（开氮气）、电（开高压 operate）、流动相（设置流动相流速和比例）

五、软件操作规范流程：

工作软件操作流程概述：

                               
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5.1调用已有项目 选择C:\Mass Data\*****.PRO项目

5.2准备液相 一般流程为：准备流动相>准备样品>灌注二元泵>灌注自动进样器>建立液相方法>平衡系统

5.3准备质谱 一般流程为：计算化合物单同位素质量数>用Intellistart开始调谐>查看Intellistart中自动生成的质谱方法

5.4建立液相方法 在液相方法编辑窗口（Inlet Method），单击Inlet

As 保存方法。单击 Load Method ，平衡液相系统。

5.5建立样品列表

5.5.1. 在Masslynx 主窗口，选择 File > New 建立一个空白的样品表Sample list或打开一个已有的SAMPLE LIST。Sample list的使用与Windows EXCEL表格类似。

5.5.2. File Name栏：输入文件名， 如training 001.建议以3位数字结尾。

5.5.3. File Text栏：输入样品信息 ，编辑参数，单击OK, 选择File > Save

5.5.4. MS File 栏：选择质谱方法

5.5.5. Inlet File栏： 选择液相方法

5.5.6. Bottle栏：输入样品瓶的位置

5.5.7. Inject Volume栏：输入进样体积

5.5.8. 可右键> Add, 增加样品表的行数

5.5.9. 保存样品表：File > Save As，输入样品表名称，将样品表保存在项目的sampledb文件夹下，建议使用有规律的命名， 如检测项目或操作人加年月。

5.6 样品采集与处理 点击

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5.7 报告输出

5.8关机与维护

5.8.1日常关机：完成实验后，应根据色谱柱的使用说明或维护指南，对色谱柱进行冲洗保存。一般如果流动相中有缓冲盐必须先将缓冲盐用高水相冲洗掉，再从高水相过渡到高有机相（如95%以上乙腈），冲洗10倍以上柱体积，停流速。关质谱：关高压（STANDBY） > 等待去溶剂气温度降低至100度以下 > 关氮气。

5.8.2 彻底关机：①先完成日常关机；②泄真空: tune page > vacuum > vent > 当涡轮分子泵转速降到40以下时，仪器会自动关闭机械泵电源；③退出软件，计算机关机；④关质谱电源 > 关所有UPLC电源；⑤关闭UPS电源。

六、使用注意事项

6.1使用后须认真履行使用登记制度，保存实验数据并填写仪器使用记录表。

6.2所有流动相都要求经0.22um过滤器过滤，水相要用前新配，并不得超过两天。样品必需使用0.22μm的膜过滤。

6.3长时间待机，注意关闭PDA检测器的氘灯。

6.4氩气少开，不用时可以关掉。

6.5清洗锥孔时，要关闭高压和锥孔阀门，↓箭头向下即关闭，←箭头向左即打开。操作时必须全程佩戴无尘手套，清洗锥孔时，锥孔头要保持向上。

6.6氮气的废液要随时观察，满了就要倒掉；质谱的废液管不能放到废液的液面以下。 开始进行图谱采集。

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WatersAcquity_UPLC培训教程

watersACQUITYUPLC操作指南

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