药群论坛

 找回密码
 立即注册

只需一步,快速开始

查看: 1217|回复: 2
打印 上一主题 下一主题

[仪器分析] 电泳法测定依诺肝素钠组分含量---非专业翻译求修改

[复制链接]
跳转到指定楼层
楼主
广州-羽剑 发表于 2015-9-21 15:01:07 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式

马上注册,结交更多好友,享用更多功能,让你轻松玩转社区

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册  

x
下述是一个肝素钠的电泳法检测含量的方法,因译者没有接触过这种试验,希望各位对译文中不专业或错误的地方提出意见和建议,万分感谢!!!

/ Z( c) S- B1 Q3 R$ A5 L) f
取琼脂4g,加水200ml,置沸水水浴中加热使溶胀完全后,于45-50℃冷却后,倒入浅口容器中,厚度约10mm,精致,待凝结成薄层后,将玻璃板平放至薄层上。
制胶  取琼脂糖289mg,加醋酸钡缓冲液(取0.04M醋酸钡适量,用冰醋酸调pH至5.8) 48ml,混匀,置水浴中加热使溶胀完全后,于45-50℃冷却,将胶液涂布于玻璃板(4.5 cm×7.5cm×1.5mm)上,厚度约1.5mm,静置,待凝胶结成无气泡的均匀薄层,即得。
电泳槽A  取琼脂糖NA 1.5g,加入醋酸钡缓冲液250ml,混匀,置水浴中加热使溶胀完全后,于45-50℃冷却,将胶液倒入电泳槽,厚度约15mm,于4℃静置过夜,待凝胶结成均匀薄层后,移走电泳槽中的电极及其中部槽架。
电泳槽B  取琼脂糖NA 1.5g,加入1,2-二氨基丙烷缓冲液(取0.05M 1,2-二氨基丙烷适量,用冰醋酸调pH至9.0)250ml,混匀,置水浴中加热使溶胀完全后,于45-50℃冷却,将胶液倒入电泳槽,厚度约15mm,于4℃静置过夜,待凝胶结成均匀薄层后,移走电泳槽中的电极及其中部槽架。
所得电泳室和玻璃板应于5±3℃中保存,并于2日内使用。
溶液配制:分别取依诺肝素钠供试品和对照品适量,分别制成浓度为10mg/ml的溶液,并往溶液中加入甲酚红,作为供试品溶液和对照品溶液。
首次电泳:
在电泳槽A内加入醋酸钡缓冲液,在槽架加入石油醚,将凝胶板置于电泳槽架上,于凝胶板负极端分别点样2μl,立即接通电源,在电压100V条件下,电泳约25分钟,关闭电源。
二次电泳:                                             
在电泳槽B内加入1,2-二氨基丙烷缓冲液缓冲液,在槽架加入石油醚,将凝胶板置于电泳槽架上,立即接通电源,在电压100V条件下,电泳约35分钟,关闭电源。
染色与脱色  取下凝胶板,浸入0.1%w/v 鲸蜡烷三甲基溴化铵水溶液至少3小时;升温至60℃,再浸泡1小时,暖气吹干,直至形成透明薄膜;再将凝胶板浸入0.1% w/v 甲苯胺南的乙醇溶液-水-冰醋酸(100:100:2,v/v/v),浸泡20分钟使其染色,再浸入乙醇-水-冰醋酸(100:100:2,v/v/v)溶液使脱色。
不同组分的斑点在蓝色琼脂糖凝胶上均呈现深紫色,自电泳开始其运行次序如下:
组分         Rf(比移值)
慢速移动肝素     0.10-0.15
快速移动肝素     0.60-0.65
硫酸皮肤素       0.75-0.80
含量测定:使用密度计对斑点面积进行定量测定,波长为600nm,衰退范围:0.250, 裂缝:0.2×10mm,扫描长度:45/50nm,从密度计读数可直接获得各待测组分的含量,当快速移动肝素对照品含量为规定限度±10%范围内,试验方有效。供试品含快速移动肝素应为72%-88%,硫酸皮肤素应为12%-28%和慢速移动肝素不得过4%
* N- G7 Q, g; r6 v3 G: ~' n$ m
回复

使用道具 举报

沙发
静悄悄 发表于 2015-9-21 15:30:56 | 只看该作者
可以自己参考药典的啊
回复 支持 反对

使用道具 举报

板凳
工作QQ1 发表于 2015-12-29 12:38:03 | 只看该作者
依诺肝素钠?楼主天道的?
回复 支持 反对

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册  

本版积分规则

QQ|手机版|药群论坛 ( 蜀ICP备15007902号 )

GMT+8, 2024-11-29 02:52 PM , Processed in 0.099759 second(s), 19 queries .

本论坛拒绝任何人以任何形式在本论坛发表与中华人民共和国法律相抵触的言论! X3.2

© 2011-2014 免责声明:药群网所有内容仅代表发表者个人观点,不代表本论坛立场。

快速回复 返回顶部 返回列表