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本帖最后由 xiaoxiao 于 2015-5-22 06:57 AM 编辑
4 Y# y7 f. u, ^) r/ @1 h$ c4 l【夯实基础】液相色谱定量分析原理
. l/ Q/ |3 c! j9 S3 R2015-05-21 仪器信息网
% l r2 Y& Z. D4 B液相色谱定量分析原理
" W8 J) b3 z E/ ^% Q在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:
& ^; {6 ]$ M U3 l被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
* I( K1 L, U6 G+ @) T1 P
由已知量的标样可求得定量校正因子 0 V8 }4 p& `/ C
液相色谱定量分析的步骤1、选择一个适合定量分析的色谱方法: 2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线
; M, v+ r0 U" o6 `1 L8 o# b3、考查定量方法的准确度及精密度* c& E3 g, }2 P1 b! a
4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果3 ^) n* T: [% P
鉴别需定量的色谱峰(定性)& V: n6 m8 p' m0 K9 N5 _8 M9 m$ i- U2 A
定性鉴别每个要定量的色谱峰/ C4 ?4 b( M& z; Y" ?1 ]% s0 u, d
首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt),通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份,色谱定性是用与标样比较保留时间的方法,判据并不充分进一步的确认(定性)1、标准加入法
% _( x1 T8 P2 ~) O, U, R8 x2、同时用其它方法:其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 、其它检测器 (PDA:光谱图比较、谱库检索;MS:质谱图解析、谱库检索)3、其它仪器方法 J. M6 ?" m5 C- G- j
确认定量峰的一致性
7 d8 a5 t2 @: X, {确认色谱峰的一致性(纯度). K& e1 T/ x/ l9 }
5 b& E. N7 B: w H' U
色谱峰一致性(纯度)确认的方法- o& b4 q2 D1 S* k2 H/ S
2996的纯度角理论 5 \% b! M. o# b
常用的定量方法
) I- d1 F C" v+ A* ]/ j标准曲线法,分为外标法和内标法:
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) a/ F0 W; f4 D$ C& W% @外标法:在液相色谱中用得最多 内标法:准确,但是麻烦,在标准方法中用得最多 影响定量分析结果的因素准确度不好可能由下述原因造成: –峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确 6 @/ T P" X- t5 y+ z1 _
精密度不好可能的原因: 峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱问题、检测器响应下降 文章来源:百度文库 7 }% @6 H$ w. [) v2 X8 o
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