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示差检测器是高效液相色谱仪上的一种检测器,配合液相色谱仪对样品进行分析检测。1 J4 a0 h1 S* V7 D; r
示差折光检测器是基于样品组分的折射率与流动相折射率有差异,当组分洗脱出来时会引起流动相折射率发生变化,这种变化与样品组分的浓度成正比,从而进行检测。
: ~) ^1 S( Z" C6 U" U, T) D5 v一、示差折光检测器类型:9 T4 Z ~' h* Q h
1、反射型:根据Fresnel定律。" t. l5 j9 _, q
2、折射型:根据Snell定律。* a6 o( c% b1 q7 e7 i* o- r
3、干涉型。
+ B I% j ]* l( j二、示差折光检测器特点:3 t" e. B8 j( Y+ q7 W) d5 G* y
1、绝大多数物质的折射率与流动相都有差异,属于通用型检测器。$ z% h3 v5 r/ c/ B
2、灵敏度低,对温度敏感,不能用于梯度洗脱。+ E) b9 v* R/ ^$ O
三、示差折光检测器应用:9 y: {5 D+ V; H% c9 g9 R
1、比较适合检测无紫外吸收的有机物,如高分子化合物、糖类和脂肪烷烃等。
4 R1 s5 G4 Y2 U2 D2 H" z/ y2、在凝胶色谱仪中是必备的检测器。
7 ~8 ^+ I8 Q/ m2 ^& Y3 q; K3 Y3、在制备色谱仪中经常使用。
4 Y6 p; ?4 i- s6 v x1 c4 `: x6 U% k( h8 P3 l5 P7 z
& U( _" Q1 `- O: R8 ^% f优点:对糖类检测灵敏度较高,其检测限可达10-8g/ml;稳定性好,操作方便。$ P( h* H- r) J1 `
缺点:该检测器对多数物质的灵敏度低(约10-5g/ml),通常不用于痕量分析;受环境温度、流动相组成等波动的影响较大,不适合梯度洗脱
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{7 ~7 z) t) `应用
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示差折光检测器主要受温度、流速以及流动相的种类等因素的影响,示差折光检测器是较难稳定,但是和仪器本身的硬件条件有问题,如能设法控制以下几个因素,情况会大有改善: (1)流动相一定要混匀,而且要充分脱气,最好用单元泵。 (2)有条件的话将溶剂瓶、柱温箱、检测器的光学单元温度控制在同一个温度,且最好高于室温5~10℃。不要将检测器放置在通风橱或是空调出风口处。 (3)环境温度不要变化太大,实验室最好门窗关闭,如果没有柱温箱那就把检测器温度调低一点。 (4)要把废液瓶和溶剂瓶放在示差检测器与泵以上位置,这样可以使样品池略有压力,有助于优化检测器性能。 此外,在安装示差检测器时,由于其流通池的反压估计为5bar,所以示差检测器在流路系统里必 须放在最后。如果还要在系统里增加一个检测器,必须放在示差检测器的前面,以防压力增大时损坏 示差检测器的流通池。同时建议在运输或搬迁示差检测器到其他场所时,流通池里最好装有异丙醇, 这是为避免在周围环境温度降低时使流通池破裂。
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