有关物质检查相对校正因子计算方法

【讨论目的】

现在的有关物质检查几乎都涉及到了特定杂质的检查，采用校正因子计算特定杂质越来越普遍，园子里面也很多战友讨论了很多。但是一定还有跟我一样对此问题存疑的战友，或许过去认为已了解的战友也存在不够准确的认识。

【提出讨论】
所提出讨论的问题也许你觉得很简单无聊，但非常希望你能参加讨论给出你的看法
①现在问到你，校正因子计算公式，你如何回答？
②为什么我们能看到的文献都是按公式（1）所得校正因子（如果是用这个公式，在计算时不能将杂质峰面积乘以校正因子，而是除以校正因子？）
③我们是不是把校正因子和响应因子搞混淆了，校正因子与响应因子的倒数关系，是通过什么得到的？
④中国药典中的规定和公式说明存在误导？

带着这些问题，就查找到的信息汇总说明：

1、公认的公式？？
查了很多资料，包括园里讨论的，包括药检所老师所写文章，几乎大家说到相对校正因子的计算方法都为：
F=（A杂/C杂）/（A样/C样） 公式（1）
这个公式在我所查到资料里可以认为是最普遍公认的公式

2、中国药典的规定
中国药典“加校正因子的主成分自身对照法”中规定计算方法：
色谱图上各杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，计算各杂质含量。这里规定的“校正因子”计算方法是按内标法校正因子：
F=（A内标/C内标）/（A对照/C对照） 公式（2）
根据公式（2），我们直接把内标换成杂质，即得到与上面的公式（1）一样的公式，即认为是杂质斜率与主成分斜率的比值，得下面公式（3）
F= 杂质斜率/ 供试品斜率 公式（3）

药典规定用F乘以杂质峰面积，假设通过该公式计算的校正因子是1.5，则说明杂质峰的响应值要大于主成分，如果在计算时再将杂质峰面积乘以1.5，结果正确吗？那这个公式对吗？

3、公式推导
假设响应因子为k，则有k=A/m（单位质量的物质相当于多少峰面积），令杂质k杂=A杂/m杂，主成分k样=A样/m样，则主成分中杂质含量w=m杂/m样*100%，即有：

w=（A杂/k杂）/（A样/k样）*100%=（k样/k杂）*（A杂/A样）*100% 公式（4）

根据药典，理论上，加校正因子以自身对照法计算杂质含量的公式简易表示应是：
w=F * A杂/ A对 公式（5）
由公式（4）（5）两式可知，计算杂质时加入的校正因子F：
F=k样/k杂=（A样/C样）/（A杂/C杂） 公式（6）

4、公式（6）和公式（1）的区别
倒数关系，相对响应因子（RRF）与校正因子F的关系如下：

F=1/RRF= Slope 主峰/ Slope imp 公式（7）
其中：Slope imp是指对应杂质的斜率，Slope 主峰是指主峰的斜率。

5、对中国药典的看法
①药典中对有关物质计算方法中的校正因子的描述，也许是拐了一个弯，对于我这种没脑子的人来讲容易误导而绕进去出不来。药典中公式对针对内标法测含量设计，不适用于杂质计算。
②药典中对“校正因子”的描述与色谱类专业书籍的不符，我所查到的是：
校正因子= C/A 公式（8）
响应因子= A/C 公式（9）
1、校正因子是相对而言的，如A相对于B的校正因子，B相对于A的校正因子二种说法，故对于你的公式（1）就有二种写法。互为倒数。

2、还是第一个回答，因为校正因子是相对而言，是相乘还是相除就是看你怎么描述。

3、第三个问题可能是你理解错了，一种物质在某种特定条件下，有所谓的响应因子，他是针对自身而言，如里条件变了，可能响应因子数值也就变了。而校正因子必须有对立面的，没有其他物质，也就没有所谓的校正因子。

4、我看了中国药典2010年版二部附录有关内容，没有找到你描述的这句话“色谱图上各杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，计算各杂质含量。”而是这么说的：“可用经验证的相对响应因子进行校正后计算。”

以下内容很冗长很繁琐但是很不强大，不感兴趣和懒的动脑的就不要再看了！

确实想搞明白本帖议题的战友，我求你能仔细阅读下面文字，共同拍砖提高！谢谢。

犹豫了三分钟，还是决定继续参与讨论，就让我继续自私的傻着先

首帖中我们提到的“中国药典2010年版二部误解”，而您所说的问题正是问题之一，因为药典是明确按照内标法的中方法计算。

同时药典也有明确乘以校正因子。但我们看billinzhang所发的文献《用加校正因子的主成分自身对照法测定苯扎贝特中杂质氯苯酪胺的含量》中所述重要部分，校正因子的获得方法和计算：

                               
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这里面用杂质斜率/主成分斜率作为校正因子，跟pharma1000说的，杂质的峰面积应该是去除这个F值才对。

矛盾就这样产生了，在我的周围，我的同事开始犯晕了，这也正是我想到发此贴的目的所在！！！

虽然~虽然，我们可以通过理解加校正因子有关物质计算的含义去做出正确的判断和计算方法，

但是当你眼前摆着药典，摆着各种由药检所的老师们写的文章的时候，往往会多了几个问号，比如校正因子有没有标准公式，跟响应因子是什么关系，一样还是不一样？

我想我应该不至于那么傻，反正不管别人怎么认为哈，我觉得我这么一折腾，我的确搞懂了，希望有更多的人通过这个帖子也能搞明白，不用再查东查西，即便自己认为原来已经会了，我想在你看完下面两个示例的内容后，你仍旧会有一写更新的收获，至少我在我跟我的同事在做此项讨论的时候，大家都有相同的感受。

如果你也有，麻烦给我投一票或回个帖，哥只求票不求分~谢谢。

示例（一）某品种的USP34的标准

方法采用加校正因子的有关物质，其计算公式为：
Result = (rU/rS) × (1/F) × 100 公式（1）

rU=peak response for each impurity from the Sample solution

rS=peak response from the Standard solution

F= relative response factor (see Impurity Table 1)

                               
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总结讨论：

（1）请大家仔细看公式（1）的F规定是何“因子”
表中规定的是“relative response factor”即RRF，即相对响应因子

（2）请大家仔细看公式（1）的F的计算方式
公式中是用1/F，即除以相对响应因子

示例（二）某品种的EP7.2标准

方法同样采用加校正因子的有关物质，EP表中的惯例是不写计算公式的，其有关物质限度是如下描述的：

                               
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总结讨论：

该方法规定的是校正因子“Correction factor”，并明确：各杂质峰面积乘以校正因子后计算。

（TLC注：虽然这里没有写relative，但其含义一致在不写“绝对”时，都为相对，可不必深究）

上面两个例子，非常清晰的展示了相对响应因子和相对校正因子的关系和计算方法，权威性当然更毋庸置疑。

提醒TLC本人今后记住：

（1）相对响应因子和相对校正因子是不同的，以后我不会不要乱写乱叫了。

（2）按照中国药典规定加校正因子的有关物质计算，规定杂质乘以校正因子。

则相对校正因子的计算方法简单表示应是

f=主成分斜率/杂质斜率


相对校正因子的计算方法简单表示应是 f=主成分斜率/杂质斜率 ， 中国药典液相色谱法附录中（1）中相对校正因子的描述仅适用于（1）法计算，对于（3）法的计算，一定要将（1）中描述的内标物质准确理解为主成分，而（1）中描述的对照品理解为已知杂质的对照品，这样就真正明确了药典表述的内容，其实药典本没有错，只是对于大家的理解描述的不够清楚而已。


申报生产常见问答--国家局
问题四：如果一速释原研药在15分钟的溶出率达85%以上，仿制制剂的15分钟溶出率是否也一定要在85%以上，然后才能以相似因子比较相似性。
     答：在比较溶出度曲线相似性时，可采用多种方法，包括应用相似因子的模型非依赖性法、模型非依赖性多变量置信区域法以及模型依赖性法等。采用相似因子（f2）是简单的模型非依赖性方法，采用该法比较相似因子时，有一定的前提条件，如：溶出度测定时间点应为三至四个或更多；试验条件应严格相同；两个曲线的溶出时间点应相同（如15、30、45、60分钟）；应采用均值进行计算，在较早时间点（如15 分钟）的变异系数百分率应不高于20%，其它时间点的变异系数百分率应不高于10%，只能有一个时间点的溶出达到85%以上，保证药物溶出90%以上或达溶出平台等。
     当原研制剂以及仿制制剂在多种溶出介质中15 min 内的平均溶出度均达到85%以上时，可认为原研制剂和仿制制剂溶出行为基本一致，无需再以多个取样点测定溶出度曲线并进行相似因子（f2）比较。
     不同国家对溶出曲线相似性的判定标准略有差异，如FDA发布的《口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》以及日本厚生劳动省颁布的《仿制药生物等效性试验指导原则》与《固体制剂处方变更后生物等效性试验指导原则》，有兴趣的申请人可查阅相关技术指导原则。




来源网络的汇总：希望对大家有帮助

谢谢楼主分享，确实很疑惑

发的有些重发内容，给楼主处理了下