液相进样针数

一、含量方法学研究所需图谱（流动相、检测限和定量限参照有关物质，如有关物质和含量方法一致，可以只做进样精密度、溶液稳定性）
1、线性：包含60%、80%、100%、120%、140%，通常是5~7针，要求r.0.999。
4 Q* I  C+ h, q/ v6 O2、进样精密度：用对照品做，单样连续进六针，要求RSD<2.0%。
3、重复性试验：双样双针，一个样进两针，六个样，两个对照，总共16针，要求RSD<2.0%。
4、回收率（准确度）：总共22针，分别做三个80%、三个100%、三个120%，一个样两针，两个对照四针，九个样18针，要求回收含量在98%~102%之间，RSD<2.0%。
8 W. ^+ R* P0 d& Z. e8 a% H5、含量测定：总共28针，方法验证—两个对照品四针，仿制品两个样四针，小试样品两个样四针。中试样品三批—两个对照四针，一批双样四针，三批六个样十二针。
6、溶液稳定性：单样单针，分别0h、1h、2h、4h、6h、8h，RSD<2.0%。
+ D+ ^6 z" O2 m- c: G0 ^  z$ j7、专属性：空白辅料、空白溶剂、正常样、热破坏样、酸破坏样、酸液空白样、碱破坏样、碱液空白、光破坏样、氧化破坏样、双氧水空白样。共九针，需达到降解约20%，该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0(已知杂质)。
8、稳定性试验：包括加速0、1、2、3、6月30、40℃，长期3、6、9、12、24月，均做含量测定和有关物质。含量测定双样双针，一样两针，一批两样，三批六样十二针，两个对照四针。有关物质做空白
; Q, J/ |3 j# _( q3 m# t溶剂，单样单针，100%样品、1%自身对照，共七针。
二、有关物质方法学研究所需图谱
1、波长扫描和流动相的选择：参照国家标准并根据欧洲药典、USP英国药典以及日本药典中收载的流动相做，取样品，配成一定浓度进样，进行比较确定，选取其中最合适的。确定流动相后，并驱样品、对照品以及国外上市样品，配成参考文献中的浓度，进样；
要求：分离度达1.5以上，分析时间通常为主身份保留时间的2-3倍，分析时间长可考虑采用梯度洗脱，共 n+3张图谱
  J% J) B8 ?! u; s! `系统适用性试验：配制6份相同浓度的杂质溶液进行分析，该杂质峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%，保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外，杂质峰的拖尾因子不得大于2.0，理论塔板数应符合质量标准的规定。（已知杂质）
耐用性：分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±20％以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：各杂质峰的拖尾因子不得大于2.0，杂质峰与其他成分峰必须达到基线分离；各条件下的杂质含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%，杂质含量的绝对值在±0.1％以内。
  q, J  c, A, o- h$ N2、空白溶剂以及辅料干扰试验：取溶解样品用的溶剂，注入液相色谱仪，记录色谱图。观察溶剂图谱情况。并取样品、处方量的空白辅料按同样方法配成一定的浓度，进样，记录的谱图。看辅料是否有干
扰。共三张图谱，辅料吸收峰面积相对于主峰<0.05%视为无干扰。 杂质定位：如有已知杂质并且杂质对照品可获得的，配制杂质对照溶液，进样，记录色谱图。共四张图谱。
3、专属性：正常样、热破坏样、酸破坏样、酸液空白样、碱破坏样、碱液空白、光破坏样、氧化破坏样、双氧水空白样。共九针，需达到降解约20%，该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0(已知杂质)。
3 e4 x! ]. i( C9 S0 B8 P$ {4、检测限与定量限：检测限用稀释法—12个样12针。配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液杂质峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%，峰面积的相对标准差应不大于5.0%。检测限S/N>3，定量限S/N>10。
5、回收率（已知杂质）：分别做三个80%、三个100%、三个120%，一个样两针，两个对照四针，九个样18针，要求回收含量在80%~120%之间，RSD<2.0%。各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
6、线性：包含60%、80%、100%、120%、140%，通常是5~7针，要求r>0.999。截距在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
2 V, @6 R- y7 n7 e( F* }/ L6 G, ]7、1%精密度：单样连续进六针，要求RSD<2.0%。
9 |$ o! o, C6 G/ `1 G8 |! t8、重复性试验（已知杂质）：双样双针，一个样进两针，六个样，两个对照，总共16针，要求RSD<15.0%。
6 T& O6 c) N: x0 {% ?1 m) |9、溶液稳定性：单样单针，分别0h、1h、2h、4h、6h、8h，RSD<2.0%。按照分析方法分别配置对照品溶液与供试品溶液，平行测定两次主成分与杂质的含量，然后将上述溶液分别贮存在室温与冰箱冷藏室（4℃）中，在1、2、3、5和7天时分别平行测定两次主成分与杂质的含量。可接受的标准为：主成分的含量变化的绝对值应不大于2.0%，杂质含量的绝对值在±0.1％以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质。
10、小试方法验证及被仿制品：被仿制品1%自身对照，被仿制品100%样品，小试100%，小试1%自身对照。方法验证：中试样品三批，100%样品和1%自身对照，空白溶剂。
11、注明：主峰图谱要求——拖尾因子0.95≤r≤1.05，分离度最好要求1.5，理论板数一般不低于3000.（个别品种需根据实际要求而定）。
三、聚合物方法学研究图谱
3 d1 p) ]+ S* N1 k' b1系统适应性试验（水和磷酸盐缓冲液）:蓝色葡聚糖2000和对照品，理论塔板数要求不低于700。
& ^- \8 v' u. r* ]! W2、空白辅料
; w  p* [6 }  \* r( s# N3、供试品
4、专属性试验：供试品，辅料干扰。
5、检测限与定量限：般以信噪比3：1相应浓度确定最低检测限，以检测限×1000的量或浓度作为测定量（浓度）
6、1%进样精密度：单样连续进六针，要求RSD<2.0%。
/ ^; i1 i5 o+ [2 }  |7、溶液稳定性：单样单针，分别0h、1h、2h、4h、6h、8h，RSD<2.0%。
& t7 x; B9 m3 u* N- a7 j8、线性：（浓度范围20%-200%）7个样。
. Q4 ], K. R* J供试品溶液的浓度与聚合物测定结果的相关性考察：制备系列的供试品溶液，浓度范围为规定浓度的50％～200％，共三份样品，以测得的高聚物峰面积对溶液浓度进行线性回归，相关系数r应大于0.99。 F值测定的重现性考察：F值为对照溶液的浓度（mg）与测得的峰面积的比值，要求日内、日间的相对标准偏差在5％以内。
对照品
% ]$ f2 u' X' ]( F  e: G20%
4 G/ a9 ^6 n; f% K50%
1 |7 v  l0 j: w80%
* j( Y: c: U* X# X% w2 H2 @7 m100%
120%
9 Y. h. Q6 g( b0 ?. {+ \1 f150%
3 f! A' P. p+ ?1 |2 M( H' u200%
9、聚合物测定（方法验证）
四、影响因素五天和十天：分别作含量测定和有关物质
含量测定双样双针，一样两针，高温，高湿，强光、对照品。 有关物质单样单针，100%样品、1%自身对照，空白溶剂。

好贴，支持一下

好帅啊

好贴，支持

好贴！

对照双样双针是否符合目前的要求，做含量药检所要求，至少三加二，比较通行的办法是五加二，您这个有出处吗？或者是基于什么考虑。望解答~~

谢谢分享，学习学习

五、液相进样针和液相进样器的区别
众所周知，液相自动进样器的进样针头，因为多次刺入样品杯的橡胶上盖，故特别容易被橡胶碎屑堵塞住针孔，造成进样不畅或根本不能进样。液相手动进样需要进样针，是一个微量注射器，一般10－100微升不等，针头是平的，这与气相进样针有区别。液相进样器有两种：手动与自动，手动进样需要进样针，它是一个六通阀及一个定量环组成。自动进样设置比较复杂，也是有六通环的，它进样不需要人工。进样也很精确（进样量及保留时间）。
六、液相进样针的使用方法
% j/ H) K3 Q' U（1） 在使用前必须检查有无针尖毛刺针卷曲以及简身裂缝。
（2） 为了消除样品之间的前一个样品的残留，需要使用样品进行5~20次的清洗。但是最初的2~3次的样品必须作废弃处理。
1 N; \4 ~- _- z（3） 为了从针筒内去除气泡、将针尖浸入在样品溶液内重复进行抽取推出的操作.（将针向上侧容易去除气泡。）
$ M4 ~4 [0 _8 N% N, l) S（4） 抽取比最终所需量多的样品，然后再再与刻度线进行对准。注意注射器不要倾斜。先用不会产生细小纤维的纸类等擦拭针尖后再注射。
（5） 使用后必须用纯水或丙酮进行清洗，在进行空气干燥后做保管。

药典就有   USPEPJP

谢谢分享，楼主辛苦啦