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标题: 液相进样针数 [打印本页]

作者: 毛毛    时间: 2017-3-29 10:49 AM
标题: 液相进样针数
一、含量方法学研究所需图谱(流动相、检测限和定量限参照有关物质,如有关物质和含量方法一致,可以只做进样精密度、溶液稳定性)
+ R' ~8 }0 Z8 b) ?2 o' `* K4 S* l1、线性:包含60%、80%、100%、120%、140%,通常是5~7针,要求r.0.999。8 _4 t  e  e) R# Y/ E! ]' `( l
2、进样精密度:用对照品做,单样连续进六针,要求RSD<2.0%。% A# o7 I/ D7 J7 e+ j2 E
3、重复性试验:双样双针,一个样进两针,六个样,两个对照,总共16针,要求RSD<2.0%。+ w- Z7 ~" Q$ ~* j8 u) [# ]* n
4、回收率(准确度):总共22针,分别做三个80%、三个100%、三个120%,一个样两针,两个对照四针,九个样18针,要求回收含量在98%~102%之间,RSD<2.0%。7 P. [$ |8 m3 Y  x
5、含量测定:总共28针,方法验证—两个对照品四针,仿制品两个样四针,小试样品两个样四针。中试样品三批—两个对照四针,一批双样四针,三批六个样十二针。
; n4 @! x) Z5 T6、溶液稳定性:单样单针,分别0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。0 v( k& h  i0 y  ~9 L
7、专属性:空白辅料、空白溶剂、正常样、热破坏样、酸破坏样、酸液空白样、碱破坏样、碱液空白、光破坏样、氧化破坏样、双氧水空白样。共九针,需达到降解约20%,该杂质峰与其它峰应能完全分离,分离度不得小于2.0(已知杂质)。
6 P; U7 |+ H( v: E3 j" o8、稳定性试验:包括加速0、1、2、3、6月30、40℃,长期3、6、9、12、24月,均做含量测定和有关物质。含量测定双样双针,一样两针,一批两样,三批六样十二针,两个对照四针。有关物质做空白- u6 r  t. p. T2 u+ c/ {
溶剂,单样单针,100%样品、1%自身对照,共七针。6 t# v& `7 h+ |
二、有关物质方法学研究所需图谱2 g$ _7 W/ k' n  F
1、波长扫描和流动相的选择:参照国家标准并根据欧洲药典、USP英国药典以及日本药典中收载的流动相做,取样品,配成一定浓度进样,进行比较确定,选取其中最合适的。确定流动相后,并驱样品、对照品以及国外上市样品,配成参考文献中的浓度,进样;
  d" q( d% J' g5 J: E! I要求:分离度达1.5以上,分析时间通常为主身份保留时间的2-3倍,分析时间长可考虑采用梯度洗脱,共 n+3张图谱
: z* x; U% S$ T* W9 r, x系统适用性试验:配制6份相同浓度的杂质溶液进行分析,该杂质峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%,保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外,杂质峰的拖尾因子不得大于2.0,理论塔板数应符合质量标准的规定。(已知杂质)
* ]6 L6 s( P. X" ?7 O耐用性:分别考察流动相比例变化±5%、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±20%以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时,仪器色谱行为的变化,每个条件下各测试两次。可接受的标准为:各杂质峰的拖尾因子不得大于2.0,杂质峰与其他成分峰必须达到基线分离;各条件下的杂质含量数据(n=6)的相对标准差应不大于2.0%,杂质含量的绝对值在±0.1%以内。* ^/ n0 u6 f! Z1 m' \
2、空白溶剂以及辅料干扰试验:取溶解样品用的溶剂,注入液相色谱仪,记录色谱图。观察溶剂图谱情况。并取样品、处方量的空白辅料按同样方法配成一定的浓度,进样,记录的谱图。看辅料是否有干
& Y6 b' e: ?. u( K6 a6 b扰。共三张图谱,辅料吸收峰面积相对于主峰<0.05%视为无干扰。 杂质定位:如有已知杂质并且杂质对照品可获得的,配制杂质对照溶液,进样,记录色谱图。共四张图谱。
( f& U+ z) a1 B# q3、专属性:正常样、热破坏样、酸破坏样、酸液空白样、碱破坏样、碱液空白、光破坏样、氧化破坏样、双氧水空白样。共九针,需达到降解约20%,该杂质峰与其它峰应能完全分离,分离度不得小于2.0(已知杂质)。4 ^* `/ c) R/ x6 o
4、检测限与定量限:检测限用稀释法—12个样12针。配制6份最低定量限浓度的溶液,所测6份溶液杂质峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%,峰面积的相对标准差应不大于5.0%。检测限S/N>3,定量限S/N>10。
8 i0 T) |# Q; C4 n! e5、回收率(已知杂质):分别做三个80%、三个100%、三个120%,一个样两针,两个对照四针,九个样18针,要求回收含量在80%~120%之间,RSD<2.0%。各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间,如杂质的浓度为定量限,则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%,相对标准差应不大于10%。
0 z1 c8 Q3 s' {; `  i  M" k. ]6、线性:包含60%、80%、100%、120%、140%,通常是5~7针,要求r>0.999。截距在100%响应值的25%以内,响应因子的相对标准差应不大于10%。
! u6 D* P, ?! \% h: e7、1%精密度:单样连续进六针,要求RSD<2.0%。) J! R3 g+ z+ _- B- e- f+ ^
8、重复性试验(已知杂质):双样双针,一个样进两针,六个样,两个对照,总共16针,要求RSD<15.0%。
9 Y1 e+ ^. y2 x7 P9、溶液稳定性:单样单针,分别0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。按照分析方法分别配置对照品溶液与供试品溶液,平行测定两次主成分与杂质的含量,然后将上述溶液分别贮存在室温与冰箱冷藏室(4℃)中,在1、2、3、5和7天时分别平行测定两次主成分与杂质的含量。可接受的标准为:主成分的含量变化的绝对值应不大于2.0%,杂质含量的绝对值在±0.1%以内,并不得出现新的大于报告限度的杂质。
' {/ z- H4 P1 R  `10、小试方法验证及被仿制品:被仿制品1%自身对照,被仿制品100%样品,小试100%,小试1%自身对照。方法验证:中试样品三批,100%样品和1%自身对照,空白溶剂。
' h9 I6 P1 F; |7 J* @11、注明:主峰图谱要求——拖尾因子0.95≤r≤1.05,分离度最好要求1.5,理论板数一般不低于3000.(个别品种需根据实际要求而定)。, ], _' H: c  N9 k8 o
三、聚合物方法学研究图谱  k7 f" K" q7 M* F0 y
1系统适应性试验(水和磷酸盐缓冲液):蓝色葡聚糖2000和对照品,理论塔板数要求不低于700。
# \! `: ?+ T+ @* m* j2 Z2、空白辅料
+ e3 K5 R, [$ [3 K3、供试品- D5 N: h9 d" z' o3 w5 l
4、专属性试验:供试品,辅料干扰。
) ]0 ?+ n8 P1 G! b+ i) W5、检测限与定量限:般以信噪比3:1相应浓度确定最低检测限,以检测限×1000的量或浓度作为测定量(浓度), p  S% J( D+ F1 A% _0 p4 D: p
6、1%进样精密度:单样连续进六针,要求RSD<2.0%。
6 }( t3 j/ i- |3 V2 t6 ^% l' E7、溶液稳定性:单样单针,分别0h、1h、2h、4h、6h、8h,RSD<2.0%。
( C0 ?/ S+ ~2 J0 |; j8、线性:(浓度范围20%-200%)7个样。: P0 e/ e! l( j0 d% ]" J1 d
供试品溶液的浓度与聚合物测定结果的相关性考察:制备系列的供试品溶液,浓度范围为规定浓度的50%~200%,共三份样品,以测得的高聚物峰面积对溶液浓度进行线性回归,相关系数r应大于0.99。 F值测定的重现性考察:F值为对照溶液的浓度(mg)与测得的峰面积的比值,要求日内、日间的相对标准偏差在5%以内。
2 A8 G+ n' R* M/ U( {对照品* @% z# N, {) l3 E0 @$ f$ c+ C
20%
9 F- M- O6 e# x6 ^5 i$ U% i. [5 a( J0 Y50%* X6 |1 |$ f" [: ?+ R% k8 ~3 ?
80%( @6 i/ g4 T7 B; f$ h2 \& l
100%
/ K0 Y6 k6 a: F  m120%  n! _* p9 |! R. J4 l
150%/ ]! Q" A0 G6 P$ F
200%
' U8 |3 W" s5 F4 q( }7 c  ?) V9、聚合物测定(方法验证)4 |: N$ p5 K- W0 E% ~
四、影响因素五天和十天:分别作含量测定和有关物质9 w4 p+ O3 C2 J5 X# |! L
含量测定双样双针,一样两针,高温,高湿,强光、对照品。 有关物质单样单针,100%样品、1%自身对照,空白溶剂。
# N7 E5 U. U! X2 o/ T& X
, r6 o4 f6 F. L: g/ |9 z+ i  @
作者: hexiao    时间: 2017-3-29 12:39 PM
好贴,支持一下
作者: yyy77fish    时间: 2017-3-29 02:16 PM
好帅啊
作者: 阿酷怕哭    时间: 2017-3-29 06:35 PM
好贴,支持
作者: vvvvwo    时间: 2017-3-30 08:10 AM
好贴!
作者: hongshan    时间: 2017-3-30 08:15 AM
对照双样双针是否符合目前的要求,做含量药检所要求,至少三加二,比较通行的办法是五加二,您这个有出处吗?或者是基于什么考虑。望解答~~
作者: xiaodong125    时间: 2017-3-31 11:37 AM
谢谢分享,学习学习
作者: xiaoxiao    时间: 2017-3-31 09:30 PM
五、液相进样针和液相进样器的区别2 z1 g+ S( J' z+ h2 a2 `
众所周知,液相自动进样器的进样针头,因为多次刺入样品杯的橡胶上盖,故特别容易被橡胶碎屑堵塞住针孔,造成进样不畅或根本不能进样。液相手动进样需要进样针,是一个微量注射器,一般10-100微升不等,针头是平的,这与气相进样针有区别。液相进样器有两种:手动与自动,手动进样需要进样针,它是一个六通阀及一个定量环组成。自动进样设置比较复杂,也是有六通环的,它进样不需要人工。进样也很精确(进样量及保留时间)。& }+ s# x! S/ k/ \- {3 u4 p% u
六、液相进样针的使用方法( x) o& A2 g! C9 f8 P9 [" z) {# u
(1) 在使用前必须检查有无针尖毛刺针卷曲以及简身裂缝。
1 Q( H& d: q4 y& x3 A/ s# Y8 O(2) 为了消除样品之间的前一个样品的残留,需要使用样品进行5~20次的清洗。但是最初的2~3次的样品必须作废弃处理。
  @% l6 H) W; H: H% o* g' T+ l9 ](3) 为了从针筒内去除气泡、将针尖浸入在样品溶液内重复进行抽取推出的操作.(将针向上侧容易去除气泡。)& G1 ~/ j6 R8 H2 C" |
(4) 抽取比最终所需量多的样品,然后再再与刻度线进行对准。注意注射器不要倾斜。先用不会产生细小纤维的纸类等擦拭针尖后再注射。
* L' c3 L; |" O0 M! N5 J" T(5) 使用后必须用纯水或丙酮进行清洗,在进行空气干燥后做保管。
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作者: xterra2012    时间: 2017-4-18 08:41 AM
药典就有   USPEPJP
作者: joysun611    时间: 2021-8-27 04:53 PM
谢谢分享,楼主辛苦啦




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