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标题: 如何选择渗透压仪？有什么注意事项？ [打印本页]

作者: 毛毛 时间: 2016-6-29 11:11 AM
标题: 如何选择渗透压仪？有什么注意事项？
首先，要确定您样本的类型，在0点以下能结冰的样品都可以选择冰点渗透压仪，大分子生物样本，则需要选择蒸汽压渗透压仪，胶体渗透压仪适用于测血管扩张力，如果是挥发性物质需要选露点渗透压仪。

然后，根据实验室的样本量，决定是选择多样品量还是单样品量型号。

目前使用最广泛的还是冰点渗透压仪。选择冰点渗透压仪的时候，诱发结晶的方式关乎测量的稳定性，买渗透压仪的时候不可不考虑。根据《2010版药典》规定，冰点渗透压仪诱发溶液结晶的方式有两种，分别是振荡法和金属探针法（一般称作二级针法）。二者的区别在于：

采用振荡法诱发结晶的渗透压仪：测量结果比较可靠和稳定。这种诱发结晶的技术只有热敏探针接触样品，诱发溶液结晶的部件不与样品接触，杜绝了样品交叉污染的可能性，所以测试结果相对更稳定。目前做的最好的振荡法诱发结晶的冰点渗透压仪，分别是美国Advanced Instrument和英国YASN的冰点渗透压仪。

二级针诱发结晶的渗透压仪：二级针诱发结晶的特征在于，金属探针或二级针每次在测试过程中，都要进入到样品中以诱发溶液结晶。选择这类品牌时，同样需要考虑样本交叉污染的问题，所以最重要的是诱发结晶的二级针是否方便擦拭，以减少交叉污染的可能性。有的厂商将二级针隐藏，擦拭不方便，仪器用了一段时间后，测试结果的平行性会变差。

除了技术因素，选择渗透压仪另外不可忽视的一个因素是耗材成本。冰点渗透压仪的耗材除了校准液，再就是一次性的样品管或样品杯。建议尽量选择开放式的样品杯。如果制造商要求使用专用样品杯，那么一定要问清单价，避免后续的耗材使用成本过高的问题。

作者: 毛毛 时间: 2016-6-29 11:11 AM

常见问题汇总

渗透压仪

1. 单位mOsmol/Kg、Osmol/Kg、mmol/L 、mmHg、g/mol、道尔顿之间的关系？

答：渗透压单位mOsmol/Kg、Osmol/Kg、 mmHg

1 Osmol/Kg=1000mOsmol/Kg

毫米汞柱（mmHg）是直接用水银柱高度的毫米数表示压强、压力值的单位，毫米与毫巴间可以进行换算。原理是以汞柱所产生的静压力来平衡大气压力P，因而汞柱的高度就可以度量大气压力的大小。在实验室,通常用毫米汞柱（mmHg）作为大气压力的单位。

标准大气压( 1.013X10^5 Pa)内可以这样换算：P=1.013X10^5 Pa=760mm·Hg 或100帕＝1毫巴≈3／4毫米水银柱高，精确转换是1mmHg=101325/760 Pa。

渗透压单位：用1升中所含的非电解质或电解质的毫摩尔表示，称为毫渗透摩尔，简称毫渗。

物质的量的浓度：溶质的物质的量浓度是指单位体积溶液中所含溶质的物质的量,用符号C表示,常用单位为mol/L，1mol/L=1000mmol/L。

摩尔质量：g/mol：单位物质的量的物质所具有的质量(1mol物质的质量）即1mol该物质所具有的质量与摩尔质量的数值等同.(物质的摩尔质量和该物质的分子量数值等同)

物质的量（n）、质量（m）、摩尔质量（M）之间的关系为：n=m/M

道尔顿：是分子量常用单位，就是将分子中所有原子按个数求原子量的代数和。

分子的摩尔质量（M）与分子的相对质量（Mr）的关系为：

M = 10-3Mr kg× mol-1

2. 冰点渗透压、胶体渗透压、膜渗透压、漏点渗透压之间的区别？

冰点渗透压：根据拉乌尔冰点原理，以溶液冰点下降值与溶液的摩尔浓度成比例关系为基础，采用高灵敏的感温元件—热敏电阻测量不同溶液的结冰点。

露点渗透压：应用沸点升高原理，水蒸气压技术，将溶液加热使之蒸发，来测量样品渗透压，是利用热电偶凝结溶液样品被蒸发而产生的蒸气感应测量。

露点法跟冰点法相比较所具有的

优势：
*  不需要改变物质的物象形态
*  可以处理冰点法无法处理的多用于临床和工业化学实验室的半固态样品。
*  对于样品中含有悬浮颗粒或粘稠度较大的样品，可以轻松得出准确的结果。
*  可以直接测量植物以及动物组织切片的渗透压。如植物的叶片，动物的脑和肾脏切片。

劣势：

露点渗透压仪不能用来检测乙醇，乙醚等挥发性溶液的样品，尤其是受热易分解的样品，而冰点渗透压仪可以。

胶体渗透压：是由测量池来测量的，测量池被半透膜分开，下半部与外界隔离，充满含电解质的林格液，上半部与外界相连，里面充满含胶体的溶液。膜仅允许水和电解质通过，两个溶液的渗透压不同，溶液能从测量池的下半部渗透到上半部，直到下半池内的压力与胶体摩尔浓度达到平衡。直接测量由液体静压的变化引起的压力。

膜渗透压：渗透池被一个半透膜分成两部分。在完全密封的下半部，充满纯溶剂，安装了精确的压力计系统。在半渗透膜的上半测量池，设计成曲线型通道系统，具有大的表面。漏斗和排液系统能用溶剂冲洗和注入测量池。由于溶剂和溶液渗透压不同，在下半池形成一个真空度代表渗透活性溶解颗粒的浓度。

3. 010、030、050、070、090、auto型号之间的区别，如何选型？（流程图）

A、 测量原理不同

010,030，auto是冰点渗透压；050胶体渗透压；070露点渗透压；090膜渗透压

B、应用不同

030适用于检测水溶液渗透压；010是基于030设计的，适用于测定苯溶液摩尔分子量和水溶液总渗透压；auto也是基于030设计的，全自动测量系统可以满足高通量的样本测量，每次最多可同时测量20个样品；050是为医药领域测试胶体的渗透压，主要是测血浆或血清以及大分子物质的渗透压；070适合测定水溶液的渗透压和溶解在不同有机溶剂中聚合物平均分子量；090测定溶解在水或有机溶剂中聚合物的平均分子量。

C、测量范围不同

010: 渗透压：0-3000mOsmol/kg, 分子量：40-5000道尔顿

030：渗透压：0-2500mOsmol/kg

Auto: 渗透压：0-2500mOsmol/kg

050: 99.9mmHg,99.9帕斯卡

070：渗透压：水溶液：0.1-1.5Osmol/kg ; 有机溶液：0.001-0.03 Osmol/kg

分子量：水溶液：50-5，000道尔顿；有机溶液：40-5，000道尔顿

090：分子量：5，000-2,000,000道尔顿

选型流程图：

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4. 二点校准与三点校准的区别，如何选择第三个校准点？

答：三点校准比二点校准具有更广的相对直线度公差+/-1%的范围，更加准确。

第三个校准点即CAL2校准点的确定：与c1相差最小的校准点之后的所有校准点。

可能的校准点如下：

1. Zero：用蒸馏水校准

2. CAL1: 100, 200, 300, 500, 700, 850, 900, 1200, 1500, 1800, 2000, 2500

3. CAL2: 300, 500, 700, 850, 900, 1200, 1500, 1800, 2000, 2500, 3000

例如：

CAL1 = 100 mOsmol/kg: CAL2可以是自300 mOsmol/kg以上的所有校准点。

CAL1 = 200 mOsmol/kg: CAL2可以是自500 mOsmol/kg以上的所有校准点。

CAL1 = 300 mOsmol/kg: CAL2可以是自700 mOsmol/kg以上的所有校准点。

CAL1 = 2000 mOsmol/kg: CAL2可以是3000 mOsmol/kg校准点。

5. 正确的校准步骤是什么？

以三点校准为例，步骤如下：

1）0点

a) 按 'Zero' 键。

b) 用测试管盛装50μL的蒸馏水。

c) 设备自动运行校准测量值。

d) 确认：用蒸馏水再次进行测量。

2）第一次校准点300mOsmol/kg

a) 按 'CAL1' 键。

b) 用测试管盛装50μL Gonotec 300mOsmol/kg校准液。

c) 设备自动运行校准测量值。

d) 确认：用Gonotec 300mOsmol/kg校准液再次进行测量。

3）第二次校准点850 mOsmol/kg

a)按 'CAL2' 键。

b) 用测试管盛装50μL Gonotec 300mOsmol/kg校准液。

c) 设备自动运行校准测量值。

d) 确认：用Gonotec 300mOsmol/kg校准液再次进行测量。

6. 多长时间做一次校准？

当测量出现较大误差时需要校准仪器，建议可在样品中增加蒸馏水样品，当仪器的偏差较大时应校准。010在进行摩尔质量测定前，必须用已知质量摩尔浓度或渗透压的溶液校准仪器。

7. 取样时的注意事项有哪些？

取样体积要符合仪器测量要求，保证样品中没有气泡。

8. 样品量的多少对测量时间和精度有什么影响？

答：一般测量的样品量在50ul左右（M型除外），样品量过多会延长测量的时间或者出现无法结晶的情况，同时测量的准确性也会有所下降。样品量过少可能影响冰晶的注入导致无法结晶，同时对测量的重复性有所影响（使重复性降低）。

9. 零点校准时，应该选择什么样的水？

答：选择蒸馏水或去离子水。

10. SPONT.CRYST灯亮时，如何排除故障？（过早结晶）

答：稀释样品。

1）晶种也有可能附着在热敏电阻探头上，用水彻底清洗热敏电阻探头，然后用软棉纸擦干。如果热敏电阻探头上表面有划痕，更换热敏电阻探头。

2）不干净测试管（例如内壁有灰尘）也可能导致自动结晶。重复使用测试管可能导致测试管塑料破裂，产生液膜（作用类似于晶种），最终会造成过早结晶。因此建议测试管只使用一次。

a) 简单地加热样本液，达到沸点后再冷却。

b) 前种方法不能去除的晶种，过滤去除。

c) 稀释样本。当冷却的样品溶液中含低溶性盐或者含盐浓度接近饱和，这时就会有盐晶

形成。稀释可以帮助去除盐晶，但可能因此无法得到精确的结果。

d) 用水彻底清洗热敏电阻探头，然后用软棉纸擦干。

e) 如果玻璃球有划痕，更换热敏电阻探头。

f)确保测试管内部没有灰尘。

g) 确保测试管内部没有液膜，否则可能导致过早结晶.测试管仅能使用一次。重复使用测试管可能导致不重复性结果。重复使用可能导致测试管塑料破裂，产生新液膜，会造成过早结晶。

11. NO.CRYST灯亮时，如何排除故障？（无结晶）

答：没有结晶的原因有两点：

⑴高渗透压:充分稀释样品溶液。但是必须小心解读稀释后的结果，因为渗透压不一定与稀释度成比例。

⑵注入冰晶无效：如果在结晶过程中声信号已经响起，尽管样品液渗透压在正常范围内，却没有结晶产生，有三种可能原因:

a、传送冰晶的针移动受阻，机械故障妨碍了针移动。解决方法：卸下电阻探头。然后将针弄直、复位，检查确保机械性能正常。按住设备后面的MOTOR 纽，检验针的移动情况。

b、尽管机械性能正常不会妨碍针移动，但不锈钢针尖上的冰晶无法到达过冷却样品溶液中。覆盖冰的针尖需通过一个小孔才能到达样品。孔上可能有水滴。水滴可能导致冰晶粘到孔的内壁上而融化。解决方法：将带有配件的巴斯德吸管与一根长管连接，用其吹掉孔上的水滴。建议移开测试管，然后用热敏电阻探头下面的纸巾擦掉水滴。随着时间的推移，孔上积留了少量的样品残液。用装水的喷雾瓶冲洗孔上残液。清洁过程中，不需关闭设备。

c、上冷却系统没有冰形成，因为湿度太低或者系统开启后过早进入工作状态。解决方法：系统开启至少2分钟后，再开始测量。如果空气湿度非常低（例如冬天在加热的房间），打开上冷却系统的盖子。必须考虑到一些重要的条件，以确保测量结果的重复性。

12. 如何确保结晶针正常工作？

答：首先检测结晶针是否在上冷却系统的凹槽内，如果发生错位请用镊子等将结晶针复位。另外可以按仪器背面“motor”键从侧面观察结晶针的运行情况。

13. 如何安装打印纸和色带？打印纸如何选择？

针对010，030：

更换打印纸：

A) 将两个螺钉拧下，移去树脂玻璃外罩。

B) 轻按打印机的下部，打开放纸区。

C) 取出空的纸卷筒，按"PAPER FEED"键，将剩余的打印纸通过出纸口输出。不可用向后拉纸带的方式取出剩余的打印纸。

D) 插入一卷新打印纸。打开OSMOMAT 010和打印机。将打印纸前端剪齐从上端插入出纸口。按"PAPER FEED"键，使纸带突出出纸口约2厘米。要确保卷纸的滚动方向正确。新的纸卷放入纸盒后关闭打印机。

E) 纸带穿过树脂玻璃外罩孔缝，然后固定外罩。下一次测量开始前，按COUNTER RESET键，打印页眉。

打印纸选择：标准宽度：43 mm，卷轴直径：34 mm Gonotec货号30.9.1010。保证大小合适即可。

更换色带：

当打印的结果不再清晰，必须更换色带墨盒。更换色带时，OSMOMAT 010 可打开也可关闭。

A) 更换色带前，撕下出纸口处突出的纸带。

B) 将两个螺钉拧下（5 图 6），移去树脂玻璃外罩(6 图 6)。

C) 轻按色带盒的右侧，取下色带盒。

D) 替换新的色带盒Gonotec货号30.9.1020。

E) 顺时针拧旋钮，绷紧色带.

F) 将新的色带盒放入打印机。纸带的前端置于色带和盒之间。

G) 再拧旋钮，绷紧色带。

H) 固定树脂玻璃外罩。

14. 如何安装软件和连接电脑？

答：

1）选择有RS232数据接口的电脑，将Gonotec的软件放入电脑驱动内按照磁盘安装提示完成软件的安装。

2）用数据线连接仪器和电脑。

3）先启动电脑中终端软件，再打开仪器电源开关。

4）仪器左边三个LED灯闪烁，仪器进入自检状态。

5）仪器自检完毕，“sample”灯亮起，可以进入想要的操作。

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