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标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理 [打印本页]

作者: xiaoxiao 时间: 2015-5-22 06:55 AM
标题: 【夯实基础】液相色谱定量分析原理
本帖最后由 xiaoxiao 于 2015-5-22 06:57 AM 编辑
【夯实基础】液相色谱定量分析原理
2015-05-21 仪器信息网
液相色谱定量分析原理
在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量定量的依据是:

被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比
. C O4 }( Q, ]! N! B1 l

由已知量的标样可求得定量校正因子

' Z! Q5 Q) X. ^. b2 S; s/ p; f

定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量
- V+ ?+ H. `$ N7 j) g" k- y4 G8 j

测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量
& f `. |7 ^( F w4 d

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法：

确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5
确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)& ^4 A. O. N7 J# S0 x6 H& h4 z

1 m4 g; T+ F) Y/ L O

确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围
8 Q* y$ [; k' v! |" {1 n1 F8 ^
. B. ?& w* W9 H# p" K4 p+ T

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线
/ E, y7 Q$ K1 D! m4 a3、考查定量方法的准确度及精密度% r' ^+ G: _4 S$ R6 W- N- q
4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果* C5 t3 ]' W: J J6 c6 s% r. i
鉴别需定量的色谱峰(定性)
定性鉴别每个要定量的色谱峰
6 N% j( \; \% V2 ]% L* W首先用标样确定欲定量之色谱峰的保留时间(Rt)，通过比较保留时间,找到未知样中各色谱峰所对应的组份，色谱定性是用与标样比较保留时间的方法，判据并不充分进一步的确认(定性)1、标准加入法/ t r( |. T6 C. [" c/ t& q4 y, ~
2、同时用其它方法：其它色谱方法(改变机理,如:用不同的色谱柱) 、其它检测器（PDA：光谱图比较、谱库检索；MS：质谱图解析、谱库检索）3、其它仪器方法, V( R( g0 e: H5 \3 P2 g
确认定量峰的一致性
确认色谱峰的一致性(纯度)
- m/ r& x: j* K- y7 n) ?

保证每个色谱峰下只有一个被测的组份3 x Y1 m5 E$ R% s C4 o3 \

, V" c2 h7 h9 P9 s6 S. V

检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
" i s: ]6 C% Y- f' A
7 h3 |! p# z b

色谱峰一致性(纯度)确认的方法
% w: `5 i+ W2 Q1 o8 b2 O0 {) {8 B

用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图
! d% n/ g, \9 V) x K' g/ A

, \# h. {7 v$ G8 |, l% U

峰纯度鉴定: Y+ r8 _# t# Q ?+ Q- y

+ t! C$ t/ |/ ~, ?

2996的纯度角理论

$ e! p$ I) l7 ?" E

常用的定量方法
标准曲线法,分为外标法和内标法:
0 I1 X E+ E" \: K

外标法：在液相色谱中用得最多

内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得最多

影响定量分析结果的因素

准确度不好可能由下述原因造成:

–峰面积积分不正确、样品分解或制样时导入杂质、样品瓶不密封,样品或溶剂挥发、制样不正确、进样问题、内标制备不正确

精密度不好可能的原因:

峰积分不正确、进样或进样器有问题、样品分解或制样时引入了杂质、色谱问题、检测器响应下降

文章来源：百度文库

作者: gongcl 时间: 2015-5-22 10:12 AM
谢谢分享

作者: 桂灵芝 时间: 2015-5-22 10:35 AM
谢谢分享！

作者: 黑龙 时间: 2015-5-22 12:12 PM
谢谢分享！

作者: ruichao2005 时间: 2015-5-24 05:20 PM
学习一下！！！！！

作者: 幻想家-13金 时间: 2015-5-25 11:25 AM
感谢分享！！！！！！

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